FITC-10-Hydroxycamptothecin，绿色荧光素标记10-羟基喜树碱的溶解与配制方法

一、绿色荧光素标记10-羟基喜树碱产品基本认知

FITC-10-Hydroxycamptothecin（FITC-HCPT）是将绿色荧光素异硫氰酸酯（Fluorescein Isothiocyanate, FITC）通过稳定共价键标记到 10-羟基喜树碱（10-Hydroxycamptothecin, 10-HCPT）或其衍生骨架上的荧光小分子探针。

中文名称‌：绿色荧光素标记10-羟基喜树碱；异硫氰酸荧光素标记10-羟基喜树碱

‌英文名称‌：FITC-10-Hydroxycamptothecin；Fluorescein isothiocyanate-labeled 10-hydroxycamptothecin；FITC-10-HCPT

‌别称‌：FITC荧光标记羟基喜树碱、绿色荧光10-羟基喜树碱偶联物、荧光素–羟基喜树碱

‌纯度‌：≥95%（HPLC检测）

‌形态‌：黄色至橙黄色固体粉末

‌规格‌：1mg、5mg、10mg、50mg、100mg，支持毫克至克级定制；可提供不同标记率规格

‌储存条件‌：-20℃干燥、避光、密封保存，避免反复冻融，建议分装后单次取用

‌保质期‌：推荐储存条件下未开封保质期12个月，建议6个月内使用以保证荧光活性

‌稳定性‌：对光高度敏感，FITC基团易发生光漂白；喜树碱E环（内酯环）在碱性条件下易开环失活，需保持弱酸性至中性环境；异硫氰酸酯键在强碱性条件下稳定性下降

‌溶解性‌：易溶于DMSO、DMF、甲醇、乙腈等有机溶剂；微溶于水，可通过超声辅助分散于PBS缓冲液中，水溶液稳定性较差

二、溶解性总原则

FITC-10-HCPT 的溶解规律可以一句话概括：

“亲有机、怕纯水、怕光照、怕反复冻融、怕强碱长时间存放。”

常见溶剂溶解倾向

三、母液配制标准流程（实验室推荐）

✅ 推荐方案：DMSO 母液法

适用：细胞实验、纳米粒示踪、共聚焦、流式、动物分布研究。

1. 准备

产品：FITC-10-HCPT 粉末

溶剂：无菌、无水 DMSO（新开封较佳）

容器：棕色 HPLC 小瓶 / 铝箔包裹 EP 管

工具：涡旋仪、超声仪、微量移液器

2. 浓度选择

常用母液浓度：

1 mM（较安全，适合细胞实验）

5 mM（常用）

10 mM（高浓度，需注意聚集和光猝灭）

20 mM+（仅限载体负载、制剂研究，不推荐新手）

3. 操作步序

粉末从 -20℃ 取出，室温平衡 10–15 min，避免冷凝水进入。

按目标浓度称样/算体积：

例：配 1 mL 5 mM 母液

若产物 MW 按具体 COA 计（FITC+HCPT 约 600–700 量级，以实际为准）

5 mM × 1 mL = 5 µmol

质量 = 5 µmol × MW mg/mmol

加入 DMSO，轻弹管壁。

避光涡旋 30–60 s。

超声（冰浴）5–10 min 助溶。

若不清亮：再涡旋 → 再短时超声；不要高温加热。

0.22 µm 有机系针式滤器过滤（可选，做细胞/动物实验建议过）。

分装：如 10 µL / 20 µL / 50 µL 小份。

铝箔包裹，-20℃ 或 -80℃ 保存。

配制母液后分装，避光、低温、干燥保存。

四、不能怎么做（避坑清单）

❌ 直接加水溶解

❌ 母液配好放 4℃ 用一个月

❌ 反复冻融 5–10 次

❌ 日光灯下敞口操作

❌ 用 Tris / 甘氨酸缓冲液长期存 FITC 类产物（胺类会竞争/影响 FITC 化学）

❌ 把“绿色荧光”直接等同于“10-HCPT 药效位点完全保留”

五、储存与稳定性