CY5.5-Mandelic Acid,CY5.5标记扁桃酸,稳定性与样品检测方法说明

产品档案

产品全称:CY5.5-Mandelic Acid;

中文全称:CY5.5标记扁桃酸;

英文全称:CY5.5-Mandelic Acid conjugate;

分子类别:近红外花菁染料-有机酸小分子偶联物;

修饰类型:CY5.5-NHS酯与扁桃酸(Mandelic acid,α-羟基苯乙酸)的羟基/氨基衍生物共价连接。

扁桃酸为手性α-羟基羧酸,分子式C₈H₈O₃,在医药领域常用于合成头孢菌素等抗生素中间体,也作为尿路消Poison 成分。CY5.5为近红外花菁染料,较大激发约675–680 nm,较大发射约690–710 nm,发射窗口位于组织光学透明区。

扁桃酸 mandelic acid

产品基本介绍

CY5.5-Mandelic Acid将近红外荧光示踪能力与扁桃酸的小分子有机酸特性相结合,可用于研究扁桃酸及其衍生物在体内的吸收、分布与代谢,也可作为近红外荧光小分子探针用于细胞摄取与药代动力学研究。近红外区检测可有效降低生物样本的自发荧光背景。

稳定性与样品检测方法

①光稳定性:花菁类染料普遍存在光漂白倾向,CY5.5在持续激发光照射下荧光强度会逐渐下降。实验操作应使用棕色离心管,室温曝光时间控制在30 min以内;长期储存放于–20℃避光。

②化学稳定性:偶联物含酰胺键及扁桃酸α-羟基,在强酸(pH<3)或强碱(pH>9)条件下易发生水解或氧化断裂;样品处理建议在中性pH缓冲液(PBS pH 7.2或Tris-HCl pH 7.4)中进行。

③热稳定性:4℃溶液中可稳定1周左右;–20℃冻存可稳定3–6个月;反复冻融超过3次会导致聚集与荧光下降,建议分装。

④氧化稳定性:水溶液中CY5.5聚甲炔链易被活性氧氧化降解,加入0.01%叠氮钠或除氧处理可延长保存期。

⑤检测方法:荧光分光光度计检测条件为激发675 nm,发射扫描685–750 nm,狭缝5 nm;HPLC分析采用C18反相柱,流动相乙腈/水(含0.1% TFA)梯度洗脱,DAD检测器675 nm检测紫外吸收,荧光检测器Ex 675 nm/Em 700 nm串联;活体成像采用670 nm激发、700 nm发射滤光片;细胞流式可使用Cy5.5或APC通道(633 nm激发,710/20 nm发射)。

⑥定量:以游离CY5.5羧基染料为标准品绘制标准曲线,线性范围0.01–5 μM。

⑦注意:扁桃酸为手性分子,若研究立体异构体代谢,需采用手性色谱柱分离R/S构型,普通C18柱无法区分。

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