CY7.5-HA，菁染料标记透明质酸，Cyanine7.5-Hyaluronic Acid：组织成像研究

CY7.5–HA菁染料cy7.5透明质酸是开发的近红外二区边缘波段荧光多糖探针，以高分子透明质酸（HA）为骨架，共价接枝CY7.5菁染料。透明质酸天然靶向CD44受体，该受体在多种tumor、Inflammation组织高表达，搭配CY7.5长波长近红外荧光，非常适合深部组织荧光成像研究，是tumor靶向成像、Inflammation示踪、皮下/间质组织分布观测的热门科研工具试剂。

产品基本信息

产品全称：CY7.5–HA，菁染料cy7.5透明质酸

英文名称：Cyanine7.5–Hyaluronic Acid

外观：深蓝色絮状固体

多糖骨架：透明质酸，可选择不同分子量HA（5 kDa、10 kDa、50 kDa、100 kDa、500 kDa）

标记度：染料取代度可定制（一般每100个二糖单元接枝1–5个CY7.5分子）

荧光参数：激发~788 nm，发射~808 nm，长波长近红外，组织散射弱、穿透深度优于CY5、CY7

溶解性：可直接溶于水、PBS缓冲液；高分子HA溶解较慢，需要低速搅拌，不可剧烈涡旋，防止多糖链断裂

储存：–20 ℃避光干燥保存；水溶液分装后短期冷藏，不可长期存放

用途：组织切片成像、小动物近红外荧光活体成像、CD44靶向示踪、Inflammation组织富集研究，仅限科研。

透明质酸是天然糖胺聚糖，由D–葡萄糖醛酸与N–乙酰葡糖胺重复二糖单元构成，大量存在于胞外基质。除CD44靶向识别之外，HA本身具备良好生物相容性、可被透明质酸酶降解，在生物体内可代谢清除，Poison 性低。CY7.5属于七甲川菁染料，共轭链更长，发射波长相比CY7红移，光散射更少，生物组织的自体荧光干扰降低，对于厚度较大的组织块、皮下组织、tumor结节成像更友好。采用活化羧基偶联策略，利用HA糖醛酸上的羧基与CY7.5–NHS活性酯反应，实现染料接枝；反应体系条件温和，尽量避免HA高分子链发生水解断链，保证多糖原始分子量。

组织成像研究应用说明

组织成像分为体外离体组织切片成像与活体在体组织成像两大方向，CY7.5–HA在两类实验中都有独特优势。

离体组织成像：包括冷冻切片、新鲜组织块孵育成像。新鲜tumor、Inflammation组织切片与CY7.5–HA工作液孵育，探针通过CD44受体介导结合在靶组织区域，使用近红外荧光成像系统采集信号。长波长CY7.5荧光穿透切片更深，厚切片也能获得均匀信号，相比短波长染料，不需要超薄切片就可以观察组织三维层面的探针分布。研究者可以定量分析荧光强度，评估不同组织CD44表达水平，对比正常组织与病变组织的摄取差异，还可以用来观察透明质酸酶对HA探针的降解效应：降解后的小分子CY7.5片段会从组织中扩散洗脱，荧光信号减弱，以此评估组织内透明质酸酶活性。这一模式广泛用于tumor微环境、关节炎Inflammation组织的体外评估。

活体组织成像：静脉或者局部皮下注射CY7.5–HA后，利用小动物近红外成像仪实时观测探针在皮下瘤、腹腔病灶、Inflammation部位的富集与代谢清除。CY7.5波长更长，皮肤、血液、脂肪组织对光子的吸收散射更少，信号可以从更深组织穿透到探测器。但是这里有一个关键变量：透明质酸分子量。低分子量HA（5–10 kDa）更容易穿透Blood vessels内皮，向tumor间质渗透，同时降解速度快，体内清除快；高分子HA（100–500 kDa）循环时间更长，但渗透进入实体瘤深部的能力弱，容易滞留在Blood vessels内。所以组织成像实验设计时，分子量选择直接决定成像结果，支持提供多种分子量CY7.5–HA供研究者对比筛选。

标记取代度也是影响成像质量的关键。取代度过低，荧光信号弱，信噪比不足；取代度太高，染料分子之间距离过近，发生荧光自淬灭，荧光强度反而下降，同时高密度染料修饰会改变HA亲水性，增大非特异性吸附，提升背景荧光。常规供货采用中等标记度，兼顾信号强度与多糖天然生物属性；高标记度版本可按需定制，但需要研究者自行评估淬灭效应。

组织成像实验常见注意事项：成像全程避光；活体成像前注意剃除动物毛发，毛发会强烈吸收近红外光造成信号衰减；设置游离CY7.5染料对照组，扣除染料非特异富集造成假阳性；HA水溶液溶解需要缓慢搅拌，剧烈震荡剪切会打断多糖长链，改变体内分布行为，成像结果不可重复。

该探针的局限：CY7.5光稳定性依旧有限，长时间连续扫描会光漂白；HA会被体内广泛存在的透明质酸酶降解，信号随时间衰减，适合短时成像观测，不适合多天长时间示踪。

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可定制不同分子量、不同取代度CY7.5标记透明质酸，磺化CY7.5版本也可按需制备，降低染料聚集倾向。